HuH-7 是人高分化肝细胞癌细胞系，贴壁生长、上皮样形态，保留部分肝细胞功能，对 HCV 高度敏感，广泛用于肝癌机制、病毒复制、药物筛选和基因编辑研究。

基本信息

分子特征

HuH-7 保留了较多肝细胞特性，可表达 AFP、ALB、HNF4A、纤维蛋白原、血浆铜蓝蛋白、纤维粘连蛋白 等。
它对丙型肝炎病毒高度敏感，是研究 HCV 复制、组装和释放的经典模型，也可用于 HBV、登革热等病毒研究。
基因组上存在 TP53 Y220C 等突变，CYP450 代谢基因表达相对较低，长期培养可能出现遗传漂变，建议定期做 STR 鉴定。

培养条件

• 培养基：DMEM + 10% FBS + 1% 青链霉素；不同供应商对高糖/低糖 DMEM 的推荐略有差异，建议优先按所购细胞说明书执行。
• 培养环境：37℃，5% CO₂，饱和湿度。
• 传代比例：1:2–1:4，部分供应商推荐 1:3–1:5。
• 换液频率：每2–3天一次。
• 消化条件：0.25% 胰酶-EDTA，37℃消化约1–4分钟，细胞变圆、部分自然脱落时终止消化。
• 冻存液：常见配方包括 90% 完全培养基 + 10% DMSO，或 10% DMSO + 20% FBS + 70% 完全培养基。

实验注意事项

1. 低密度时生长慢：接种密度过低容易恢复慢，复苏时建议一个冻存管接种到 T25 瓶或 6 cm 皿中。
2. 触角/伪足属正常：低密度或增殖期出现多触角、拉丝样形态，通常随密度升高改善。
3. 黑色颗粒不一定污染：胞内黑点多为细胞器、囊泡或碎片；背景少量黑点多为细胞碎片。碎片较多时可用预热 PBS 轻洗。
4. 消化不宜过度：HuH-7 贴壁不算特别牢，强行吹打容易损伤细胞，建议消化至部分细胞自然脱落后再终止。
5. 建议做 STR 鉴定：长期传代、复苏旧冻存管、投稿或动物成瘤前，最好核对 STR 图谱，避免交叉污染或身份错误。